Lactobacillus spp. (качественный метод)
| Описание | Показания | Подготовка | Интерпретация |
Описание исследования
Lactobacillus spp. (лактобактерии) — род грамположительных анаэробных не образующих споры молочнокислых бактерий, жизнедеятельность которых не может осуществляться вне бактериоценоза здорового человека.
Количество известных на сегодняшний день видов лактобактерий превысило 150. Различные биотопы (области организма, отличающиеся относительно однородными факторами среды) могут быть обиталищем 15-20 их разновидностей. Нормальная флора женщины, способной зачинать и рожать детей, содержит порядка 5-6 видов лактобактерий. В здоровом организме именно они являются основой микробиоценоза (т.е. совокупности разных видов бактерий, обитающих в одном биотопе).
Колебание абсолютного количества лактобактерий имеет довольно широкую амплитуду и, по результатам различных исследований, может составлять 90 – 99,9% микрофлоры влагалища. Участие этих микроорганизмов в жизнедеятельности организма многообразно. В частности они:
- влияют на обменные процессы;
- поставляют витамины В, С, К, фолиевую и никотиновую кислоты, биотин (витамин В7);
- вырабатывают такие вещества как аминокислоты, уксусную, молочную и прочие органические кислоты;
- вырабатывают вещества подобные гормонам и антибиотикам;
- продуцируют перекись водорода и пр.
Дисбиоз влагалища считается выраженным при процентном содержании лактобактерий ниже 20 % относительно всех выделенных микроорганизмов или при полном их отсутствии. Низкий уровень лактобактерий не обязательно указывает на наличие патологии, вызываемой нарушениями баланса микрофлоры. Однако такое состояние может быть предупреждающим сигналом о высокой вероятности развития заболевания. Для постановки диагноза «дисбиоз» в этом случае необходимо наличие подтверждающих данных: клинических проявлений заболевания и (или) присутствия диагностически значимого количества условно-патогенных микроорганизмов.
Для качественного определения специфических фрагментов ДНК Lactobacillus spp. в соскобе клеток эпителия влагалища и цервикального канала применяется метод полимеразной цепной реакции с наблюдением за процессом в режиме «онлайн».
Аналитические показатели анализа:
- специфичность теста – 100%;
- чувствительность метода – 100 копий ДНК лактобактерий в исследуемой пробе;
- исследуемый участок – фрагмент ДНК, специфичный для Lactobacillus spp.
Подготовка к исследованию
Соскоб (цервикальный канал, влагалище)
Соскобы у женщин отбираются не ранее пятого дня от начала менструального цикла и не позже пятого дня до предполагаемой даты следующей менструации. Если наблюдаются явные признаки заболевания, отбор пробы проводится непосредственно в день обращения.
Требования по подготовке к тестированию:
- за день до и непосредственно в день отбора материала запрещено спринцевание влагалища;
- накануне исследования запрещено применение вагинальных препаратов – мазей, свечей и т.п.
Проба не отбирается:
- параллельно с приемом внутрь или местным применением антибиотиков – после окончания курса лечения должно пройти не менее двух недель при местной терапии и 30 дней после внутреннего приема антибактериальных препаратов;
- во время менструации;
- ранее, чем через 24-48 часов после полового контакта;
- после внутривлагалищного УЗИ;
- после колькоскопии (диагностического осмотра входа во влагалище, его стенок и шейки матки при помощи специального прибора – кольпоскопа);
- после мануального исследования и прочих манипуляций.
Показания к исследованию
- при профилактических обследованиях;
- при обследовании беременных;
- при подозрении на дисбактериоз влагалища;
- для контроля действенности назначенной терапии.
Интерпретация исследования
Поскольку тест является качественным, то ответ имеет одну из формулировок: «обнаружено» или «не обнаружено».
Референсные значения: «обнаружено».
Получение результата «не обнаружено» свидетельствует:
- об отсутствии в исследуемой пробе специфических участков ДНК Lactobacillus spp. и, как следствие, о дисбактериозе влагалища;
- о том, что уровень ДНК в образце ниже определяемого порога.
Результат анализа выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример результата по данному анализу представлен ниже:
Ф.И.О.: Иванова Ирина Ивановна Пол: ж Год рождения: 01.01.0000
Дата исследования: 12.12.0000
Источник
Lactobacillus spp.
Материал для исследования: соскобы эпителиальных клеток из цервикального канала, уретры, влагалища.
Метод определения: качественное определение ДНК Lactobacillus spp. методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Исследование проводится с использованием ПЦР-тест-системы производства Литех (Россия).
Лактобактерии (Lactobacillus spp.) занимают ведущее место в вагинальном микробиоценозе. Они участвуют в формировании экологического барьера и обеспечивают резистентность вагинального биотопа, препятствуя проникновению патогенных микроорганизмов. Лактобактерии оказывают существенное влияние на процессы обмена веществ, обеспечивают организм человека витаминами группы В, С, К, никотиновой и фолиевой кислотами, биотином, вырабатывают аминокислоты, молочную, уксусную и другие органические кислоты, антибиотико- и гормоноподобные вещества, перекись водорода.
Лактобактерии обладают набором свойств, которые позволяют конкурировать с условно-патогенными микроорганизмами и колонизировать определенный биотоп организма. Нарушение нормальной микрофлоры влагалища приводит к резкому снижению титра лактобактерий или полному их исчезновению. Происходит замещение лактофлоры Gardnerella vaginalis и условно-патогенной анаэробной флорой, в том числе Bacteroides, Mobiluncus, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum.
Выявление лактофлоры методом ПЦР позволяет оценить состояние вагинального микробиоценоза. Выявление лактофлоры на фоне отсутствия представителей условно-патогенной флоры свидетельствует о нормальном состоянии вагинального биотопа. При обнаружении как лактобактерий, так и других микроорганизмов можно предположить переходное состояние, тогда как отсутствие лактофлоры указывает на серьезное нарушение состояния микробиоценоза влагалища — бактериальный вагиноз или вагинит.
Источник
Дисбиоз влагалища (ФЕМОФЛОР)
| Описание | Показания | Подготовка | Интерпретация |
Описание исследования
Влагалище новорожденных девочек стерильно, однако в течение первых суток жизни начинается его заселение всякого рода микроорганизмами: аэробными (нуждающимися для жизнедеятельности в кислороде) и факультативно-анаэробными (теми, жизненный цикл которых проходит без доступа кислорода, но его присутствие не является для них губительным).
Микробиоценоз (совокупность микроорганизмов) влагалища женщин, достигших детородного возраста, представляет собой устойчивую и сбалансированную систему. Она характеризуется наличием разных микроорганизмов, которые способны выживать и сосуществовать в определенной среде, не являясь при этом возбудителями патологий. Доминируют в этом многообразии лактобактерии*, создающие во влагалище кислую среду за счет выработки а-оксипропионовой молочной кислоты. Кислая среда является препятствием для размножения болезнетворных бактерий. Дополнительным защитным фактором является выработка данными бактериями перекиси водорода, лизоцима и других гликолитических ферментов.
Лактобактерии – не единственные обитатели влагалища здоровой женщины. Кроме них «население» может быть представлено значительным количеством видов других бактерий, а также грибами, вирусами и простейшими. При изменении количественного и качественного соотношения представителей постоянной микрофлоры мочеполовой системы происходит дисбаланс системы. Его могут сопровождать нарушения обмена веществ, сбои иммунной системы. Не исключено проявление клинических признаков заболевания, высшей степенью которого является развитие дисбиоза влагалища. Частными случаями данной патологии являются:
- бактериальный вагиноз (изменение микрофлоры влагалища, не сопровождаемое воспалительным процессом, характеризуемое отсутствием грибов, гонококков, трихомонад и прочих болезнетворных микроорганизмов);
- урогенитальный кандидоз (заболевание слизистых оболочек половых органов, вызываемое действием дрожжеподобных грибов Candida);
- инфекции, вызываемые микоплазмой.
Диагностика заболевания проводится посредством традиционных методов клинических и лабораторных исследований:
- микроскопии естественных и окрашенных препаратов по методу Грамма или метиленовым синим;
- бактериологического исследования;
- ПЦР-тестирования.
Ограничениями качества стандартных лабораторных методов исследования является ряд объективных причин, а также человеческий фактор (профессиональный уровень лаборантов, отбирающих пробу и врача, проводящего диагностику). Оптимальным решением является проведение тестирования методом полимеразной цепной реакции с отслеживанием результатов в режиме реального времени. Исследование позволяет сделать количественную оценку микроорганизмов, имеющих значение в диагностике заболевания, труднокультивируемых и некультивируемых грамположительных и облигатно анаэробных (живущих только при отсутствии молекулярного кислорода, который является для них смертельным) грамотрицательных бактерий.
Фемофлор – это комплексное обследование микрофлоры мочеполового тракта женщин, проводимое методом полимеразной цепной реакции с наблюдением за процессом в режиме реального времени. Его чувствительность для всех микроорганизмов, кроме Mycoplasma genitalium, составляет 10 000 копий ДНК в миллилитре; Mycoplasma genitalium – 2 000 копий ДНК/мл.
В рамках данного комплекса проводится:
- сравнительный анализ представителей нормальной и условно-патогенной флоры с общим количеством населяющих влагалище микроорганизмов (т.о. определяется сбалансированность биоты – совокупности присутствующих бактерий);
- степень выраженности дисбаланса;
- определение влияния конкретных микроорганизмов на возникновение нарушения;
- контроль качества отобранной для исследования пробы.
Преимущества данного метода исследования заключаются в скорости проведения и объективности полученной информации о качественном и количественном составе микрофлоры. Также, исследование служит:
- для улучшения качества терапии и ее индивидуализации;
- для наблюдения за действенностью назначенного лечения;
- для определения стадии выздоровления;
- для составления прогноза течения заболевания;
- для контроля качества полученного материала.
Показатели, определяемые при проведении тестирования:
- общая бактериальная масса;
- нормальная микрофлора: Lactobacillus spp. (лактобактерии);
- факультативно-аэробная микрофлора: Enterobacterium spp. (энтеробактерии), Streptococcus spp.(стрептококки);
- облигатно-анаэробная микрофлора: Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/Porhyromonas spp. Eubacterium spp.;
- патогенная микрофлора: Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium;
- дрожжеподобные грибы: Candida spp.;
- степень чистоты влагалища.
В словаре терминов микробиологии описывается 4 степени чистоты влагалища:
- 1 степень характеризуется преобладанием в микрофлоре лактобактерий, особенно одной из их разновидностей – бактерии Дедерлейна, отсутствием лейкоцитов и патологических микробов; рН влагалища – 4-4,5 (кислая среда);
- 2 степень характеризуется наличием большого количества палочек Дедерлейна с примесью грамположительных кокков и, по разным оценкам от 0 до 10 лейкоцитов; рН = 5,0 – 5,5 (кислая среда);
- 3 степень чистоты определяется при малом количестве палочек Дедерлейна, многообразии и разнообразии микрофлоры (грибки, палочки) с присутствием в ней лейкоцитов и преобладанием кокков (стрептококков, стафилококков); для этой степени характерно наличие выделений, зуда, воспалительного процесса; рН = 6 – 7,2 (щелочная среда);
- 4 степень – это полное отсутствие лактобактерий, микрофлора представлена стрептококками, стафилококками, энтеробактериями; наблюдается увеличение количества лейкоцитов; среда щелочная.
Для женщин репродуктивного возраста нормальной считается 1 и 2 степень чистоты. 3 и 4 степени являются признаками дисбактериоза или воспалительного процесса (исключение составляют предменструальный, менструальный период и роды).
Для женщин климактерического и постклимактерического возраста нормой является 3 и 4 степени чистоты влагалища.
*Lactobacillus spp. (лактобактерии) — род грамположительных анаэробных не образующих споры молочнокислых бактерий, жизнедеятельность которых не может осуществляться вне бактериоценоза здорового человека. Количество известных на сегодняшний день видов лактобактерий превысило 150. Различные биотопы (области организма, отличающиеся относительно однородными факторами среды) могут быть обиталищем 15-20 их разновидностей.
Подготовка к исследованию
Соскоб клеток эпителия отбирается с бокового или заднего нижнего свода влагалища.
Для получения корректного результата исследования необходимо, чтобы в тестируемом биоматериале содержалось как можно больше эпителиальных клеток и как можно меньше слизи и крови.
Поскольку на количество и виды бактерий, присутствующих во влагалище, оказывает непосредственное влияние фаза менструального цикла, исследование рекомендуется проводить в первой (после 5 дня от начала) или второй (не позже, чем за 5 дней до предполагаемой менструации) половине менструального цикла. Исключение составляют только случаи присутствия явных симптомов заболевания – тогда проба отбирается непосредственно в день обращения.
Требования, предъявляемые к подготовке:
- за день до отбора пробы и непосредственно в день обследования запрещено спринцевание влагалища;
- материал не отбирается во время проведения общего или локального антибактериального лечения;
- противопоказанием к тестированию является прием пробиотиков (препаратов, содержащих живые микроорганизмы) или эубиотиков (пищевых активных биодобавок);
- в течение 1-2 суток перед обследованием необходимо воздержаться от интимной близости;
- отбор пробы проводится не ранее, чем через 24-48 часов после проведения интравагинального УЗИ, кольпоскопии, мануального, инструментального обследования, физиопроцедур и прочих манипуляций.
После применения антибактериальных средств тестирование целесообразно проводить:
- через 2 недели – после локальной терапии с применением антибактериальных средств;
- через 30 дней – после системного лечения антибиотиками.
Показания к исследованию
Посредством данного теста делается расширенная оценка микробиоценоза влагалища. Исследование применимо в случаях наличия нескольких очагов заражения, отсутствия явных симптомов, при наличии вероятности развития осложнений. Полученные результаты позволяют подойти к процессу лечения индивидуально и адекватно, без назначения лишних препаратов. Применяется данный метод тестирования:
- для обследования не беременных женщин детородного возраста при наличии объективных или субъективных признаков поражения мочеполовых путей;
- для обследования перед проведением операции в области малого таза;
- для профилактических обследований;
- при планировании беременности;
- для определения действенности проведенной терапии.
Интерпретация исследования
Результаты обследования выдаются на бланке лаборатории медицинской компании «Наука».
В столбце «результат» указывается относительное количество генетически родственных групп микроорганизмов в общей бактериальной массе (ОБМ) и сама ОБМ.
Единицы измерения, применяемые для определения относительных количественных показателей – отношения степени десятичного логарифма к ОБМ (Lg×n)/ОМБ).
Также в этом столбце дается качественная оценка микоплазмам (Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium), формулируемая «отсутствует» или «присутствует».
Последней характеристикой состояния влагалища является степень чистоты (подробная информация о критериях оценки степени чистоты представлена в разделе «Описание»).
Референсные значения отражены в столбце «нормы интерпретации».
Нижеприведенная таблица содержит результаты конкретного анализа и референсные значения для женщин детородного возраста по каждой группе выявляемых микроорганизмов:
Ф.И.О.: Иванова Арина Ивановна Пол: ж Год рождения: 01.01.0000
Дата исследования: 12.12.0000
Источник
